Toxicologistas usam Microamostragem para Quantificar Biomarcador

Toxicologistas usam Microamostragem para Quantificar Biomarcador de Abuso de Álcool

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por Neoteryx, em 20 de outubro de 2020

Outubro de 2020 — As estatísticas de mortes relacionadas ao álcool em todo o mundo são impressionantes. Números da Organização Mundial da Saúde (OMS) revelam que, a cada ano, cerca de três milhões de pessoas em todo o mundo morrem em decorrência do abuso de álcool. Isso é aproximadamente uma em cada 20 mortes relacionadas ao álcool em todo o mundo.

Estatísticas do Instituto Nacional de Abuso de Álcool e Alcoolismo (NIAAA) nos Estados Unidos revelam que há aproximadamente 88.000 mortes relacionadas ao álcool nos EUA a cada ano. Fora desse número, quase 10.000 mortes nos EUA estão relacionadas à condução de veículos sob efeito de álcool. Outras estatísticas revelam que o transtorno por uso de álcool (TUA) também afeta negativamente a saúde, a carreira e o bem-estar das famílias.
Para ajudar a resolver esse problema de saúde global, cientistas pesquisadores estão investigando maneiras de ajudar as comunidades médicas, governamentais e policiais a melhorar os programas de prevenção e intervenção do álcool, identificando métodos para detectar e quantificar o uso e abuso de álcool.

A equipe de pesquisa do Laboratório de Toxicologia da Universidade de Ghent forneceu acesso a um artigo revisado por pares para a revista Talanta, descrevendo seu estudo de fosfatidiletanol (PEth) como um marcador direto da ingestão de álcool. Os pesquisadores de Ghent trabalharam com a equipe de pesquisa do laboratório do Instituto Nacional de Criminalística e Criminologia (NICC) para desenvolver um método quantitativo para analisar PEth em amostras como biomarcador de ingestão de álcool.

Para seu estudo colaborativo de PEth, as equipes de pesquisa em ambos os laboratórios usaram a coleta remota de amostras como uma maneira rápida e fácil de coletar amostras de indivíduos em campo, sem a necessidade de assistência no local do pessoal de saúde. Espera-se que os esforços colaborativos de ambos os laboratórios levem a um método repetível para quantificar PEth que possa ser usado por uma rede maior de laboratórios na Bélgica, Europa e além.

Coleta Remota de Amostra e Microamostragem Volumétrica Absorvente no Laboratório

Microamostras de sangue seco foram coletadas dos sujeitos do estudo usando dispositivos Mitra® da Neoteryx. O dispositivo Mitra é baseado na tecnologia de microamostragem volumétrica absorvente(VAMS®), que permite que praticamente qualquer pessoa colete uma amostra de volume fixo adequada para análise laboratorial. Os pesquisadores relatam que, uma vez que as microamostras chegaram ao laboratório, o PEth 16:0/18:1 foi quantificado após a extração líquido-líquido usando dois métodos independentes de diluição isotópica – cromatografia líquida – espectrometria de massa em tandem. Os investigadores em ambos os locais realizaram uma revisão sistemática de todo o processo antes da comparação final do método. Para o estudo, eles usaram amostras de 59 casos de toxicologia de rotina coletados em um intervalo de um ano.

Executando a Validação do Método para Chegar a Resultados Promissores

Os dois laboratórios resolveram as diferenças iniciais entre seus métodos concentrando-se em aspectos metodológicos importantes: verificação da veracidade do protocolo de calibração focando no material primário, preparação das soluções de reserva e equilíbrio adequado dos calibradores e Controles de Qualidade (CQs). Eles também se concentraram em verificar a comparabilidade de seus resultados, que foram obtidos com diferentes transições m/z. Vários desses aspectos só puderam ser verificados avaliando criticamente amostras enriquecidas e nativas. Após uma validação final, observaram boa comparabilidade média dos dois métodos. Eles relatam que o viés médio foi de -0,4%, com 85% das diferenças dentro de 20%. Além disso, os métodos mostraram-se reprodutíveis e robustos em um intervalo de tempo de um ano.

De acordo com o artigo, co-autoria dos Dr Katleen Van Uytfanghe, Maria del Mar Ramirez Fernandez, Aurelie De Vos, Sarah MR Wille e Christophe Stove, este estudo é o primeiro a desenvolver um método quantitativo baseado em microamostragem volumétrica absorvente para medições de PEth. Além disso, é o primeiro estudo a realizar uma comparação sistemática de medições de PEth entre dois laboratórios.

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