Microamostragem para Teste de Adesão de Antipsicóticos
por Neoteryx
Um artigo de Cathy M. Jacobs, et al, no Instituto de Farmacologia Clínica e Toxicologica Experimental, Centro de Sinalização Molecular, Universidade de Saarland, Homburg, Alemanha, foi publicado na edição de janeiro de 2021 do Jornal de Química Analítica e Bioanalítica, relatando uma validação analítica de 13 medicamentos antipsicóticos que compararam amostras de sangue capilar coletadas com Dispositivos Mitra® baseados na tecnologia VAMS® e amostras de plasma. O artigo é intitulado “Desenvolvimento, validação e aplicação de um método quantitativo baseado em microamostragem volumétrica absorvente em sangue capilar digital por meio de HPLC-HRMS/MS aplicável para monitoramento de adesão de antipsicóticos”, descreve o desenvolvimento e validação de um método analítico para extração de drogas antipsicóticas comuns de uma matriz de sangue seco. A equipe de pesquisa comentou que seus resultados também mostraram que a tecnologia VAMS® pode ser uma ferramenta promissora para a adesão no monitoramento e que a estratégia de VAMS® que eles desenvolveram é consistente com os resultados encontrados em plasma.
Monitoramento de Medicamentos Antipsicóticos
De acordo com relatórios recentes, quase quatro milhões de pessoas só nos EUA estão tomando medicamentos antipsicóticos para tratar problemas de saúde mental, como transtorno bipolar e esquizofrenia. Um dos grandes desafios no tratamento dessas condições é a baixa adesão relatada ao regime medicamentoso. Por exemplo, foi relatado anteriormente na Alemanha que não é esperado que 40% das pessoas que sofrem de transtorno bipolar e esquizofrenia possam aderir aos seus medicamentos conforme prescrito. Esse baixo nível de adesão é uma grande preocupação, pois pode levar a um aumento no impacto das doenças, complicações graves, maiores taxas de internação hospitalar e, infelizmente, maiores taxas de suicídio. Por essas razões, é fundamental realizar testes de adesão ou monitoramento de pacientes em uso de antipsicóticos. Os métodos primários para monitoramento e teste de adesão são a coleta de amostras de sangue de pacientes ou participantes do estudo para analisar soro ou plasma de sangue venoso. No entanto, foi relatado que o uso da punção venosa para coletar amostras de sangue venoso causa ansiedade e desconforto com a agulha para muitas pessoas. Esses fatores podem desencorajar os pacientes a cumprirrem o cronograma de monitoramento de adesão. Além disso, a punção venosa requer um flebotomista treinado, o que limita onde e quando a amostra de um paciente pode ser coletada.
Outra abordagem para o monitoramento de adesão é medir os níveis de drogas na urina. Essa tem a vantagem de que a coleta de urina não é invasiva, tornando-a menos estressante para pacientes sensíveis ou ansiosos. No entanto, a desvantagem de medir os níveis de medicação apenas pela urina é que ela é uma medida qualitativa. Isso torna uma abordagem de nível de concentração de droga relacionada à dose menos precisa, a menos que você a complemente com testes de soro. Uma outra complicação do teste de urina é que certos medicamentos podem permanecer detectáveis na urina por longos períodos de tempo devido às baixas taxas de depuração renal e complicações com o metabolismo. Isso às vezes leva à subnotificação de não adesão. Por fim, há preocupações quanto a adulteração de amostras de urina, substituindo a amostra por urina sintética, ou por urina de outra pessoa – práticas que são uma preocupação na recuperação de viciados e em campos esportivos competitivos.
Uma opção para monitorar a adesão é empregar a microamostragem remota, onde médicos, pacientes ou participantes de estudos podem coletar facilmente as amostras em diferentes ambientes em momentos diferentes. Os autores relataram em estudos anteriores onde o papel-filtro (Cartão DBS) foi usado com sucesso para amostragem domiciliar. A razão para isso é que as amostras capilares são coletadas por punção capilar através da autocoleta ou por coleta assistida de um cuidador em casa. A abordagem de amostragem por micropunção no dedo foi encontrada em outros estudos para reduzir a ansiedade e a dor ou desconforto em comparação com a amostragem por punção venosa.
Embora a amostragem por micropunção no dedo tenha se mostrado vantajosa de várias maneiras, os autores deste artigo observaram que haviam desvantagens no uso do papel-filtro tradicional, como irregularidade da amostra, imprecisão do volume e efeito volumétrico associado ao hematócrito. Para ajudar a superar essas desvantagens em fluxos de trabalho tradicionais com papel-filtro, soluções foram desenvolvidas nos últimos anos, como o emprego de microamostragem volumétrica absorvente usando Dispositivos Mitra® baseados na Tecnologia VAMS®.
Devido aos benefícios observados com os dispositivos de microamostragem volumétrica absorvente, o grupo de pesquisa optou por desenvolver um método empregando microamostras Mitra® de 10 µL, adequadas ao monitoramento de adesão, para complementar a análise de urina.
Método de Estudo de Adesão à Medicação e Resultados
O grupo de pesquisa desenvolveu e validou um ensaio HPLC-MS/MS em ambas amostras de plasma e de sangue seco Mitra® para 13 medicamentos antipsicóticos de acordo com a Diretriz da Agência Europeia de Medicamentos (EMA) sobre Validação de Métodos Bioanalíticos e a Associação Internacional de Monitoramento de Medicamentos Terapêuticos e Clínica Diretrizes de Toxicologia – IATDMCT (International Association of Therapeutic Drug Monitoring and Clinical Toxicology) para amostras de sangue seco.
Os medicamentos estudados foram: amissulprida, aripiprazol, ciamemazina, clozapina, haloperidol, melperona, olanzapina, paliperidona, pipamperona, prometazina, protipendil, quetiapina e risperidona.
Em termos de exatidão e precisão, todos os analitos atenderam aos critérios de validação, exceto por dois dos medicamentos que falharam em um nível.
O ensaio passou na integridade da diluição desde que a matriz em branco processada contendo IS tenha sido usada.
O efeito do hematócrito relacionado à matriz atendeu aos critérios de aceitação para todos os analitos num Ht de 40% e também atenderam aos critérios de aceitação os Hts de 20% e 60% para todos analitos, exceto por 3 (haloperidol, olanzapina e protipendil). No entanto, os autores comentaram que isso não deve ser um problema para pacientes com flutuação normal do Ht.
A recuperação de extração (CVs) foi considerada aceitável para todos os analitos, exceto para ciamemazina, olanzapina e protipendil.
A recuperação da extração em Hts de 20% e 60% para todas as drogas, exceto 4, não diferiu mais de 15% em comparação com o Ht de 40% .
Todos os fármacos apresentaram estabilidade de pelo menos uma semana a 24°C, exceto ciamemazina, melperona, olanzapina, prometazina e protipendil.
O grupo realizou um estudo de adesão de prova de conceito a partir de sangue com EDTA combinado em amostras de Mitra® e soro. Dos medicamentos testados (n=9, nem todos os medicamentos estavam disponíveis para esta avaliação), a medida de adesão diferiu apenas uma vez entre as amostras VAMS® e plasma.
Os autores do estudo sugeriram que essa abordagem de monitoramento de adesão também pode ser útil para o monitoramento de medicamentos terapêuticos, mas as relações entre plasma e sangue devem primeiro ser estabelecidas. No entanto, os autores também citaram trabalhos anteriores referentes a amostras de sangue seco, onde os resultados de ambas as matrizes pareciam concordantes para os antipsicóticos testados em alguns estudos, o que se mostra promissor para aplicações futuras. No entanto, eles foram claros ao reiterar que é necessário mais estudos para explorar mais essa aplicação.
Conclusões dos Autores do Estudo
- Um fluxo de trabalho para quantificação de 13 antipsicóticos foi desenvolvido e validado com sucesso usando apenas 10 µL de sangue.
Houve concordância entre as amostras de plasma e as amostras VAMS®.
A Tecnologia VAMS® superou o viés encontrado no papel-filtro, mas nem todos os analitos foram estáveis no sangue seco.
Comentários da Neoteryx
O monitoramento de adesão é uma excelente ferramenta para garantir que os pacientes em uso de antipsicóticos mantenham seus regimes de tratamento. No entanto, os problemas com a adesão à medicação não se limitam aos antipsicóticos. De fato, uma ampla gama de taxas de não adesão são encontradas em diversas condições de saúde e, recomendamos a leitura de um excelente livro sobre o assunto (Analytical Chemistry for Assessing Medication Adherence) de Sangeeta Tanna e Graham Lawson. Existem muitas razões pelas quais as taxas de adesão variam, mas certamente uma razão é o desconforto e a inconveniência de coletas regulares de sangue usando punção venosa. Assim, a microamostragem remota é uma ferramenta chave que se mostra promissora para maior conveniência, conforto e aderência.
No entanto, uma preocupação expressada em relação à amostragem remota ou domiciliar é a integridade da amostra em relação à verificação da identidade das amostras. Existem várias ferramentas e estratégias que foram desenvolvidas para ajudar a superar problemas de adulteração de amostras ou da cadeia de rastreabilidade. Uma delas é ter um profissional qualificado para supervisionar o evento de coleta, seja pessoalmente ou virtualmente por meio de vídeo ao vivo. Uma empresa de ciências da vida, chamada Promega, desenvolveu um teste genético que verifica a identidade da pessoa cujas amostras de sangue foram coletadas remotamente usando dispositivos Mitra® – um tópico que será discutido mais adiante em um blog futuro.
Este estudo foi resumido para nossos leitores por James Rudge, PhD, Diretor Técnico da Neoteryx. Este é um conteúdo com curadoria. Para saber mais sobre a importante pesquisa descrita neste blog, visite o artigo original publicado no Journal of Analytical and Bioanalytical Chemistry.
Caso você precise de alguma ajuda ou suporte por favor entre em contato com nossos Especialistas em Microamostragem: [email protected]